Western Blotting檢測,WB實驗代測,WB實驗服務
簡要描述(shu):信(xin)帆生物提(ti)供 Western Blotting檢(jian)(jian)測服務,全程提(ti)供技術指導,代測時間(jian)為(wei)兩(liang)周(zhou),歡(huan)迎(ying)!Western Blotting檢(jian)(jian)測,WB實驗(yan)代測,WB實驗(yan)服務所有產品(pin)僅(jin)供科(ke)研使用(yong)(yong),不得用(yong)(yong)于(yu)食用(yong)(yong),醫(yi)療等(deng)其(qi)它用(yong)(yong)途(tu)。
產品型號:
所屬分類:實驗代測
更(geng)新(xin)時(shi)間:2017-03-20
廠商性質:經銷商
信帆生物提(ti)供 Western Blotting檢測服務(wu),全程提(ti)供技術指(zhi)導,代(dai)測時間為兩周,歡迎(ying)!Western Blotting檢測,WB實驗代(dai)測,WB實驗服務(wu)
Western Blotting檢測,WB實(shi)驗代測,WB實(shi)驗服務
免疫印跡(ji)(immunoblotting)又(you)稱蛋白質印跡(ji)(Western blotting),它(ta)是根據抗原(yuan)抗體(ti)的特(te)異性(xing)結合檢
測復(fu)雜樣品中的某種(zhong)蛋白的方法(fa)。該法(fa)是在凝膠(jiao)電泳(yong)和固相(xiang)免(mian)疫(yi)測定技術基礎上(shang)發展起來的一(yi)種(zhong)新的免(mian)疫(yi)
生化技術。由(you)于免疫印跡具有SDS-PAGE 的(de)高(gao)分辨力和固相(xiang)免疫測定(ding)的(de)高(gao)特異性(xing)和敏(min)感(gan)性(xing),現已成為蛋白分
析(xi)(xi)的(de)一種(zhong)常規(gui)技術。免疫印跡常用于鑒(jian)定(ding)(ding)某種(zhong)蛋白,并能對蛋白進行定(ding)(ding)性和半定(ding)(ding)量(liang)分析(xi)(xi)。
凝膠遷(qian)移或(huo)電泳遷(qian)移率實驗(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是(shi)一種研究DNA 結合(he)蛋(dan)
白和其相關的DNA 結合(he)序列相互作用(yong)的技術(shu)(shu),可用(yong)于(yu)定性和定量分析。這(zhe)一(yi)技術(shu)(shu)zui初用(yong)于(yu)研究DNA 結合(he)蛋白,目(mu)前已用(yong)于研究RNA 結合蛋白和特定的RNA 序列(lie)的相互(hu)作用(yong)。
項目(mu) | 市場價(元) | 優(you)惠(hui)價(元) | 說明 |
Western blot 檢測(ce) | 1500元/膜 | 電訊元/膜 | 每張膜1--8樣本(一抗需確認) |
EMSA 800 | 2800元(yuan)/膜 | 電訊元/膜(mo) | 每張膜(mo)1--8樣本(探針及試劑需確認) |
Western Blotting 技術服務
Western blot樣本要求
客戶需新鮮或正確保存的蛋白樣品, 檢測目的蛋白的一抗(或由本公司代購)。樣品要求為:
1、裂解樣品(pin)總(zong)蛋白(bai)量>500ug/樣品(pin)。
2、細胞樣品總蛋白濃度>1mg/ml。
3、組織樣品(pin)總蛋白(bai)濃度>10-15mg/ml。
Western blot結果及數據提(ti)供
內參蛋(dan)白(bai)和(he)目的蛋(dan)白(bai)曝光膠(jiao)片(pian)各(ge)一張,可提供掃(sao)描(miao)圖,實驗(yan)報告,包括整個試(shi)驗(yan)流程所涉(she)及的實驗(yan)數據和(he)實驗(yan)步驟。如需進行蛋(dan)白(bai)純化服務(wu),將提供檢測報告
服務內(nei)容
我們提供從蛋白制備、蛋白電泳到Western blot檢測的全流程服務,如需要還可進行灰度分析。
說明
1、建議提(ti)供(gong)目的蛋白(bai)陽性(xing)表(biao)達樣品(純蛋白(bai)或(huo)有陽性(xing)表(biao)達的細胞或(huo)組織)作為陽性(xing)對照。
2、每張膜檢測1-8個(ge)樣品。
3、如果一抗(kang)由客戶提供,請(qing)在(zai)正確條件下保存,避免污染(ran)及反復凍融(rong)。
關(guan)于Western blot實驗異常分析
『無(wu)信號』
原因 | 建議 |
一抗與二抗不匹配 | 選擇針對一抗來源種屬制備的二抗; |
一抗不識別目的的種屬的蛋白 | 1)檢查抗體的說明書,適用范圍內是否包含目的種屬 |
一抗或二抗不足,沒有足夠的抗體結合到目的蛋白 | 1)降低抗體稀釋倍數,增加抗體濃度 |
封閉劑與一抗有交叉反應 | 改變封閉劑 |
抗原不足 | 1)每個泳道加入20-30ug總蛋白 |
在檢測的組織內目的蛋白表達水平低 | 檢測樣本不表達目的蛋白選擇表達量高的細胞作為陽性對照,用于確定檢測樣本是否為陰性,也可更換細胞系 |
蛋白轉膜效率低 | 1)利用麗春紅檢測轉膜效率;檢查轉移裝置是否電極弄反 |
膜過渡洗滌 | 減少洗滌時間和強度 |
疊氮鈉抑制二抗活性 | 二抗稀釋液內不用疊氮鈉 |
『沒有特(te)異條帶』
原因 | 建議 |
細胞系傳代過多后蛋白表達譜發送變化 | 1)使用未傳代或傳代次數較少的細胞系進行樣品制備 |
蛋白本身有很多修飾 | 1)查閱文獻,確定目的蛋白是否存在多種修飾 |
蛋白被消化或者降解 | 1)蛋白樣品確保未被污染,確保含有蛋白酶抑制劑 |
所檢測蛋白存在多種剪接體,導致分子量大小不同 | 1)查閱文獻或者通過搜索數據庫來確定該蛋白是否存在多種長度不同的編碼mRNA |
一抗或二抗濃度高 | 1)減低抗體濃度 |
洗滌不夠 | 1)充分洗滌 |
『條帶大小不正確(que)』
原因 | 建議 |
目的蛋白被降解 | 確保蛋白樣品未被污染,確保含有蛋白酶抑制劑 |
存在不同的剪接體 | 查閱文獻或者通過搜索數據庫來確定該蛋白是否存在多種長度不同的編碼mRNA |
重組蛋白 | 檢測是否存在額外加入的蛋白 |
特殊蛋白如MDM2等 | 仔細閱讀抗體說明書 |
尊敬(jing)的客戶:
本公(gong)司(si)有(you)放射免(mian)疫技術服(fu)(fu)務(wu)、蛋白質(zhi)組學服(fu)(fu)務(wu)、免(mian)疫組化、PCR技術服(fu)(fu)務(wu)、生(sheng)物信(xin)息(xi)學數據分(fen)析等,如(ru)果您(nin)想(xiang)了解Western blot的(de)更(geng)多內容或者其(qi)他服(fu)(fu)務(wu)信(xin)息(xi),您(nin)可以本公(gong)司(si)的(de)了解更(geng)多產品的(de)詳細信(xin)息(xi),至(zhi)善(shan)至(zhi)美(mei)的(de)服(fu)(fu)務(wu)是我們(men)永無止境的(de)追求(qiu),歡迎新(xin)老客戶(hu)放心選(xuan)購自己心儀產品,我們(men)將竭誠為您(nin)服(fu)(fu)務(wu)!
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