樣本保存不當很容易影響ELISA實驗的結果

大家在做實(shi)驗的(de)(de)時候，樣本的(de)(de)收(shou)集和(he)保(bao)存尤為重要(yao)，樣本收(shou)集保(bao)存不當，可(ke)能(neng)對您的(de)(de)結果產生(sheng)很嚴(yan)重的(de)(de)影(ying)響，下面(mian)讓我們信帆(fan)生(sheng)物的(de)(de)技(ji)術給大家講解一下樣本應該怎么(me)保(bao)存和(he)收(shou)集！

（1）標本溶血 由于各種人為原因引起的標本溶血，均可因紅細胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為標記的 ELISA 測定中，會導致非特異性顯色，干擾測定結果。為克服上述干擾作用，標本采集時必須注意避免溶血。

（2）標本受細菌污染 因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶，因此，被細菌污染的標本同溶血標本一樣，亦可產生非特異性顯色而干擾測定結果。

（3）標本保存不當 在冰箱中保存過久的標本，血清中 IgG 可聚合成多聚體、AFP 可形成二聚體，在間接法 ELISA 測定中會導致本底過深、甚至造成假陽性；標本放置時間過長（如一天以上），有時抗原或抗體免疫活性減弱，亦可出現假陰性。為克服上述干擾，ELISA 測定的血清標本宜為新鮮采集；如不能立即測定，5 天內測定的血 清標本可存放于 4℃，1 周后測定的血清標本應低溫凍存；凍存后融解的標本，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混合后再測定，但混勻時應輕柔，不可強烈振 蕩。

（4）標(biao)本(ben)凝(ning)(ning)集不全 在(zai)沒(mei)有促凝(ning)(ning)劑(ji)和抗凝(ning)(ning)劑(ji)存在(zai)的(de)(de)(de)情(qing)況下，正常血(xue)(xue)液采集后(hou) 1/2~2 h 開(kai)始凝(ning)(ning)固，18~24 h *凝(ning)(ning)固。檢(jian)驗工作中(zhong)，有時(shi)(shi)為了爭取時(shi)(shi)間快速檢(jian)測，常在(zai)血(xue)(xue)液還 未開(kai)始凝(ning)(ning)固時(shi)(shi)即強行離(li)心分(fen)離(li)血(xue)(xue)清(qing)，此時(shi)(shi)的(de)(de)(de)血(xue)(xue)清(qing)中(zhong)仍殘留(liu)部分(fen)纖維(wei)蛋(dan)白(bai)原，在(zai) ELISA 測定(ding)過程中(zhong)可(ke)以形成(cheng)肉眼可(ke)見(jian)的(de)(de)(de)纖維(wei)蛋(dan)白(bai)塊，易造成(cheng)假(jia)陽性(xing)結(jie)果；這類情(qing)況 于次(ci)日復(fu)查(cha)時(shi)(shi)因血(xue)(xue)凝(ning)(ning)已*，血(xue)(xue)清(qing)中(zhong)不再(zai)有纖維(wei)蛋(dan)白(bai)原存在(zai)，故復(fu)查(cha)結(jie)果變為陰性(xing)。為避免上(shang)述干擾作用，解決的(de)(de)(de)辦法是血(xue)(xue)液標(biao)本(ben)采集后(hou)必須(xu)使(shi)其充(chong)分(fen)凝(ning)(ning)固后(hou)再(zai) 分(fen)離(li)血(xue)(xue)清(qing)，或標(biao)本(ben)采集時(shi)(shi)用帶分(fen)離(li)膠的(de)(de)(de)采血(xue)(xue)管或于采血(xue)(xue)管中(zhong)加入適當的(de)(de)(de)促凝(ning)(ning)劑(ji)。

樣本保存不當很容易影響ELISA實驗的結果