甘油檢測試劑盒：甘油是一種非常重要的物質，廣泛的應用于工業生物試劑中，在食品工業中，常被作為保濕劑、增香劑和增色劑等使用，以改良食品的質量。甘油是釀酒酵母發酵過程中的副產物,也是灰質葡萄孢新陳代謝過程中的一個重要產物，甘油是高品質果酒的一個成分，高品質的葡萄汁中不含有(或只含有痕量或微量)甘油，濃度大約為1%(v)，若葡(pu)萄汁中含(han)有甘(gan)油(you)則(ze)意味著產品中使用(yong)了(le)品質不好的(de)原料(liao)。甘(gan)油(you)也(ye)常(chang)常(chang)作為(wei)潤滑劑用(yong)在(zai)洗(xi)滌液、乳酪和牙膏中，在(zai)制(zhi)煙(yan)(yan)工業(ye)中，通(tong)過通(tong)常(chang)是預先向煙(yan)(yan)葉上噴(pen)灑甘(gan)油(you)以保障不會粉碎的(de)目的(de)。 

適用范圍：測定血(xue)液(ye)、細胞培養(yang)基、體液(ye)、酒(jiu)類飲(yin)料中(zhong)的甘油濃度。

組成(cheng) ：  

R1試(shi)劑 40 ml

R2試劑 10 ml     

4 mmol/L甘油標準品1 ml

4 oC，儲(chu)存3個月。

所(suo)需設備：酶標儀、生化分(fen)析儀或(huo)721、722型可(ke)見光(guang)分(fen)光(guang)光(guang)度計。佳工作(zuo)波長550nm，如無(wu)此波長建議優先選用570nm、次選530、490nm。

操作步(bu)驟：

一 樣本處理：

酒(jiu)類(lei)、飲品、清澈液體樣本：可(ke)直(zhi)接進行測定，如(ru)超過(guo)線性范圍可(ke)用蒸(zheng)餾(liu)水或生理鹽水稀釋后再測定。

培養(yang)(yang)液：取不含酚紅、無顏色、無血清(qing)的細胞培養(yang)(yang)基(ji)，如有細胞碎片應4oC,，12,000g離(li)心5min,取上清(qing)進行測定。

血(xue)(xue)(xue)液：新鮮抗(kang)凝血(xue)(xue)(xue)，4oC，2,000g離心(xin)5min得到血(xue)(xue)(xue)漿；非抗(kang)凝血(xue)(xue)(xue)，先4oC靜置2h得到血(xue)(xue)(xue)清后，2000g離心(xin)10min,除(chu)去血(xue)(xue)(xue)細(xi)胞(bao)。將得到的血(xue)(xue)(xue)漿/血(xue)(xue)(xue)清70oC 加熱10分(fen)鐘滅活內源脂肪(fang)酶，12,000g離心(xin)10min ,取上清測定(ding)或-20oC保存。

二(er) 工作溶液配制：按4:1比例，取4 ml試(shi)劑R1與1 ml試(shi)劑R2混(hun)合，立即使用或4oC保存<1天，變(bian)色棄去。

三 標(biao)準品稀(xi)釋(shi)：用(yong)蒸餾水(shui)、生理鹽(yan)水(shui)或與樣品緩沖液(ye)一致的(de)液(ye)體，將4 mM甘油(you)標(biao)準品倍比稀(xi)釋(shi)為1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125 µmol/L，通常取其中(zhong)4~6管即(ji)可，注(zhu)意設置0濃度對照反應管。

四 甘油濃度測定：

參見下(xia)表(biao)進(jin)行加樣(yang)。為使反應(ying)(ying)時間盡量一致，減小(xiao)實驗誤(wu)差，可(ke)先加入標準品(pin)(pin)(pin)、待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)(pin)(pin)，然后再加入工作溶液。（注意：當甘(gan)油濃度較低時，可(ke)將待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)(pin)(pin)與(yu)工作溶液按(an)照100µl:100µl體積(ji)混合，然后再進(jin)行測(ce)定，但(dan)是如果樣(yang)品(pin)(pin)(pin)體積(ji)超過(guo)100µl時將會(hui)稀(xi)釋工作液中酶(mei)的濃度，使反應(ying)(ying)靈(ling)敏度下(xia)降。如果待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)(pin)(pin)濃度超過(guo)線性范圍，可(ke)進(jin)行適當稀(xi)釋，然后根(gen)據稀(xi)釋倍數來計(ji)算樣(yang)品(pin)(pin)(pin)中甘(gan)油濃度。）

37oC或25oC反應(ying) 10分(fen)鐘。反應(ying)平衡后顏(yan)色在60分(fen)鐘內(nei)穩定。

先用蒸(zheng)餾(liu)水+工作(zuo)液的空白管調(diao)零，然(ran)后測定各(ge)管OD值。

繪制標準曲線并計算(suan)甘油濃度。

附Excel作圖(tu)步(bu)驟(zou)：各標(biao)準管OD值為y軸，標(biao)準品濃(nong)度為x軸。(1)鼠(shu)標(biao)左(zuo)鍵圈住(zhu)數據，點擊做圖(tu)向導，選擇-散點圖(tu)-，點擊-完成(cheng)-。(2)鼠(shu)標(biao)右鍵點圖(tu)上的某(mou)一點，點擊-添加(jia)趨(qu)勢線-，點擊-選項-，點擊-顯(xian)示公式-和-R2值-。

甘油檢測試劑盒