產品更新-人胚腎細胞
培養基 90%DMEM-H+10%FBS
傳代方法 復蘇(su)步驟:①凍存管(guan)(guan)從液(ye)氮或-80℃冰箱中取(qu)出放(fang)入PE手套中,迅(xun)速沒入37℃水浴(yu)鍋,搖晃凍存管(guan)(guan)加(jia)速溶解,以1min內全(quan)(quan)部溶解為宜;②在超凈臺中將溶解好的細胞(bao)液(ye)加(jia)入到(dao)裝有(you)9mL完(wan)-全(quan)(quan)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基的離心(xin)管(guan)(guan)內,1000-1200rpm離心(xin)5min,棄去上清液(ye),用1-2mL完(wan)-全(quan)(quan)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基重懸細胞(bao)。③將細胞(bao)懸液(ye)加(jia)入到(dao)含有(you)5-6mL完(wan)-全(quan)(quan)-培(pei)養(yang)(yang)(yang)基的T25瓶中,放(fang)入培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱培(pei)養(yang)(yang)(yang)。
細(xi)(xi)(xi)胞傳(chuan)代:①將(jiang)(jiang)舊培(pei)養液吸除,PBS清洗(xi)兩遍(bian)后,加(jia)入(ru)1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀(guan)察消(xiao)(xiao)化(hua)情況,在細(xi)(xi)(xi)胞邊緣縮小,貼(tie)壁松動時(可用吸管(guan)吸起些許(xu)胰酶輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)(da)細(xi)(xi)(xi)胞層某處(chu),肉眼(yan)可見細(xi)(xi)(xi)胞層脫落,即(ji)消(xiao)(xiao)化(hua)完成,否則繼續消(xiao)(xiao)化(hua)),直接吸掉胰酶,加(jia)入(ru)5-6mL完-全培(pei)養基,輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)(da)細(xi)(xi)(xi)胞層,把細(xi)(xi)(xi)胞層吹(chui)落,吹(chui)散。③將(jiang)(jiang)細(xi)(xi)(xi)胞懸液按1:2比例分(fen)到新的T25瓶中,添加(jia)適當的完-全培(pei)養基,把細(xi)(xi)(xi)胞懸液打(da)(da)勻,于(yu)培(pei)養箱中培(pei)養。;④注意(yi)培(pei)養基pH值變化(hua)和細(xi)(xi)(xi)胞密(mi)(mi)度(du),定期(qi)換液(每(mei)周2-3次),待細(xi)(xi)(xi)胞密(mi)(mi)度(du)達到80%-90%時,重(zhong)復傳(chuan)代操作或者凍存。
生長條件 37℃;5%CO2+95%空氣;
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
安全等級 0
形態(tai) 上皮細胞樣,多(duo)角形,邊緣不規則,單層貼(tie)壁生長,背景干凈