人肺鱗狀細胞癌細胞正確傳代

細胞（英文(wen)名：cell）并(bing)沒有統一(yi)的(de)定義(yi)，比較普(pu)遍的(de)提法是：細(xi)胞(bao)是生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)體基本的(de)結(jie)構和(he)功能(neng)單位(wei)。已知除病(bing)毒之外的(de)所(suo)有生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)均由細(xi)胞(bao)所(suo)組(zu)成，但病(bing)毒生(sheng)(sheng)命活動也必須在細(xi)胞(bao)中才能(neng)體現。一(yi)般來說(shuo)，細(xi)菌等(deng)絕(jue)大部分(fen)微生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)以及原生(sheng)(sheng)動物(wu)(wu)由一(yi)個細(xi)胞(bao)組(zu)成，即單細(xi)胞(bao)生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)，高等(deng)植物(wu)(wu)與高等(deng)動物(wu)(wu)則是多細(xi)胞(bao)生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)。

細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)可分為(wei)原(yuan)核(he)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)、真核(he)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)兩類，但也有(you)人提出應(ying)分為(wei)三類，即把原(yuan)屬于原(yuan)核(he)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)古(gu)核(he)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)獨(du)立出來(lai)作為(wei)與(yu)(yu)之并(bing)列的(de)(de)一類。研(yan)究細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)學(xue)科稱為(wei)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)生物(wu)學(xue)。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)體形極微，在顯微鏡下始(shi)能窺見，形狀(zhuang)多種多樣(yang)。主要由(you)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)核(he)與(yu)(yu)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)質(zhi)構成，表面(mian)有(you)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)膜(mo)。高(gao)等(deng)植物(wu)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)膜(mo)外有(you)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)壁(bi)，細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)質(zhi)中常(chang)(chang)有(you)質(zhi)體，體內(nei)有(you)葉綠(lv)體和液泡(pao)，還有(you)線粒(li)體。動物(wu)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)無細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)壁(bi)，細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)質(zhi)中常(chang)(chang)有(you)中心體，而(er)高(gao)等(deng)植物(wu)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)中則(ze)無。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)有(you)運動、營養和繁殖(zhi)等(deng)機能。

培(pei)養(yang)基 RPMI-1640完-全培(pei)養(yang)基：90%RPMI-1640+10%FBS

傳(chuan)代方法 復蘇步驟：①凍存(cun)管從液(ye)氮或-80℃冰箱中(zhong)取出(chu)放入(ru)(ru)(ru)PE手套中(zhong)，迅(xun)速沒入(ru)(ru)(ru)37℃水(shui)浴鍋(guo)，搖(yao)晃(huang)凍存(cun)管加速溶(rong)解，以1min內全(quan)部溶(rong)解為宜(yi)；②在超(chao)凈臺(tai)中(zhong)將溶(rong)解好的(de)細胞(bao)液(ye)加入(ru)(ru)(ru)到(dao)裝有9mL完-全(quan)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)離心管內，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液(ye)，用1-2mL完-全(quan)培(pei)養(yang)基(ji)重懸細胞(bao)。③將細胞(bao)懸液(ye)加入(ru)(ru)(ru)到(dao)含(han)有5-6mL完-全(quan)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)T25瓶中(zhong)，放入(ru)(ru)(ru)培(pei)養(yang)箱培(pei)養(yang)。

細胞(bao)(bao)(bao)(bao)傳代：①將舊培(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)(ye)吸除，PBS清洗兩遍(bian)后，加(jia)入(ru)1-2mL胰(yi)酶(mei)（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀(guan)察消(xiao)化(hua)情況(kuang)，在細胞(bao)(bao)(bao)(bao)邊緣縮(suo)小，貼壁(bi)松動時（可(ke)用(yong)吸管吸起些(xie)許胰(yi)酶(mei)輕(qing)輕(qing)吹打細胞(bao)(bao)(bao)(bao)層某處，肉眼可(ke)見細胞(bao)(bao)(bao)(bao)層脫落(luo)，即消(xiao)化(hua)完(wan)(wan)成，否則繼續消(xiao)化(hua)），直接吸掉胰(yi)酶(mei)，加(jia)入(ru)5-6mL完(wan)(wan)-全(quan)培(pei)養(yang)(yang)基，輕(qing)輕(qing)吹打細胞(bao)(bao)(bao)(bao)層，把細胞(bao)(bao)(bao)(bao)層吹落(luo)，吹散。③將細胞(bao)(bao)(bao)(bao)懸液(ye)(ye)(ye)按1:2比(bi)例分(fen)到新的T25瓶中，添加(jia)適(shi)當的完(wan)(wan)-全(quan)培(pei)養(yang)(yang)基，把細胞(bao)(bao)(bao)(bao)懸液(ye)(ye)(ye)打勻，于培(pei)養(yang)(yang)箱中培(pei)養(yang)(yang)。；④注意培(pei)養(yang)(yang)基pH值變化(hua)和(he)細胞(bao)(bao)(bao)(bao)密度(du)，定期換液(ye)(ye)(ye)（每(mei)周2-3次(ci)），待(dai)細胞(bao)(bao)(bao)(bao)密度(du)達(da)到80%-90%時，重復傳代操作或者凍存。

生長條(tiao)件(jian) 37℃；5%CO2+95%空(kong)氣；

生長特性 貼壁生長

存儲條件 液氮

安全等級 0

形態 上皮(pi)細胞樣，不規(gui)則形

 
共享方式 公益性共享