凍干粉標準菌株傳代和復壯
【冷凍管開封】 用浸過 75%酒精的脫脂棉嚴格(ge)消(xiao)毒(du)冷凍管蓋(gai)。
【菌(jun)株復(fu)溶(rong)】無菌(jun)環境中(zhong)旋開裝有復(fu)溶(rong)液的滴(di)瓶蓋(gai),吸取 1ml 左右(you)復(fu)溶(rong)液,加入(ru)到冷(leng)凍管中(zhong)。輕輕振蕩,使凍干菌(jun) 株溶(rong)解呈懸(xuan)浮(fu)狀(zhuang)。
【菌株復(fu)壯】用無(wu)菌吸管吸取(qu)菌懸液(ye),轉移到復(fu)溶液(ye)滴瓶(ping)中。做好標(biao)識,在(zai)適宜溫度下培(pei)養(yang)(yang)。細(xi)菌在(zai) 30-35℃培(pei)養(yang)(yang) 箱(xiang)中培(pei)養(yang)(yang) 24-48h,真菌在(zai) 20-25℃培(pei)養(yang)(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)(yang) 24-72h(必要時,可(ke)適當延(yan)長培(pei)養(yang)(yang)時間)。
【菌株(zhu)傳代】將得到的(de)菌株(zhu)的(de)新鮮培(pei)(pei)養(yang)物轉接(jie)到適(shi)宜的(de)固體培(pei)(pei)養(yang)基及(ji)液體培(pei)(pei)養(yang)基中(盡量(liang)增大(da)接(jie)種量(liang):如(ru)用無(wu)菌吸 管吸取≥50μl 新鮮培(pei)(pei)養(yang)物至固體培(pei)(pei)養(yang)基,邊(bian)移動邊(bian)緩慢釋放),適(shi)宜溫(wen)度下培(pei)(pei)養(yang),用以菌株(zhu)的(de)保藏、傳 代及(ji)制備(bei)工作菌株(zhu)。
【注意事項】
1、 菌種活化(hua)前,將(jiang)冷凍管保存在低溫、清潔、干燥的(de)環境中,長時間(jian)室溫下放(fang)置會導致菌種衰退;
2、 冷(leng)凍管開(kai)封、凍干粉復(fu)溶、菌(jun)株恢(hui)復(fu)培養等操作應在無菌(jun)條件(jian)下(xia)進行(xing);
3、 一(yi)些菌種經(jing)過(guo)冷凍干(gan)燥保存后,延遲期較(jiao)長,部分需(xu)連(lian)續兩次繼代培(pei)養才能正常生(sheng)長;
4、 苛(ke)養菌(jun)的培(pei)養需(xu)采(cai)用含特(te)定(ding)營養成分(fen)的培(pei)養基,敬(jing)請(qing)正確(que)選(xuan)擇,不(bu)清(qing)楚(chu)時(shi)來電詢問(wen);
5、 某些厭氧(yang)菌(jun)的培(pei)養,自開封到接種(zhong)完(wan)成,均需以無氧(yang)氣(qi)體充(chong)填,以保持(chi)厭氧(yang)狀態;培(pei)養過程(cheng)中亦要保 持(chi)厭氧(yang)狀態;
6、 某些菌種,如肺炎鏈球菌、流感嗜(shi)血桿(gan)菌、淋病奈瑟菌等需要 5-10%CO2促(cu)進生長;
7、 如(ru)發現冷凍管蓋松動(dong)、復溶液渾(hun)濁(zhuo)等異常情況,應停止使用對應產品(pin)。
8、 部分菌種(zhong)有致病(bing)性(xing)、擴散性(xing),請專業(ye)人員在專業(ye)環境(jing)下有保護性(xing)操(cao)作。